技術文章
Elisa試劑盒實驗包被的條件該如何選擇？點擊次數：1174 更新時間：2022-05-13
Elisa試劑盒具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查，而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此，也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體，而且也可用于測定體液中的循環抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫學各領域的應用范圍日益擴大。
Elisa試劑盒實驗包被的條件選擇：
1、包被抗原的選擇
包被抗原可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。天然蛋白需經純化才能用直接吸附法包被，對于含雜質較多的抗原可以采用間接捕獲法包被(先用能夠與目的抗原反應的物質如抗體直接吸附在酶標板上，再通過特異性反應使抗原固相化)。經純化的重組蛋白一般皆可直接包板。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機化合物，由于分子量太小，往往難于直接吸附在酶標板上，一般都先使其與無關蛋白質如BSA等偶聯，偶聯物吸附于固相載體上。
2、包被液的選擇
一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液，如果包被的抗原在堿性條件下不穩定的話，也可以使用pH7.2的磷酸鹽緩沖液。
3、包被溫度的選擇
通常是4-8度條件下過一夜或者37度保溫2小時，我們強烈建議4-8度條件下包被，有利于蛋白活性的保持。
4、包被濃度的選擇
包被的較適濃度隨固相載體和包被物的性質變化，一般蛋白質的包被濃度為1-5ug/ml，要明確針對特定包被抗原的較適包被濃度需要通過實驗來確定。
|
|||||
|
|||||
 |
